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Regeneração de plantas de Phaseolus vulgaris L. a partir de calos e transformação genética via Agrobacterium.; Plant regeneration from callus of Phaseolus vulgaris and genetic transformation via Agrobacterium.

Guidolin, Altamir Frederico
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 04/02/2003 Português
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37.15582%
A transformação genética pode contribuir substancialmente para o melhoramento genético do feijão, permitindo a introdução de genes que contribuam para o aumento da produtividade e estabilidade da produção. A metodologia de transformação genética de feijão (Phaseolus vulgaris), ora disponível (biobalística em embriões) apresenta baixa eficiência, o que dificulta o seu uso em pesquisas envolvendo a transferência de genes e não permite seu uso de forma ampla em programas de melhoramento genético da cultura. Um método efetivo e reprodutível de regeneração de plantas, a partir de células ou tecidos, é essencial em estudos de genética e melhoramento envolvendo a transferência de genes pela engenharia genética. Os métodos de transformação somente terão sucesso se tivermos previamente estabelecido um protocolo eficiente de regeneração de plantas a partir de tecidos potencialmente transformáveis. O objetivo principal deste trabalho é o desenvolvimento de um protocolo de transformação genética de feijão via Agrobacterium. O primeiro passo no desenvolvimento deste protocolo foi o estabelecimento de um sistema eficiente de regeneração de plantas a partir de calos. O passo seguinte foi o estabelecimento de metodologia da transformação de calos via Agrobacterium.; The genetic transformation can contribute substantially with the bean (Phaseolus vulgaris L.) breeding...

Transformação genética de cana-de-açúcar por biolística e Agrobacterium tumefaciens visando estudar o mecanismo de morte celular programada; Genetic transformation of sugarcane by biolistic and Agrobacterium tumefaciens to study the mechanism of programmed cell death

Melotto-Passarin, Danila Montewka
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 08/04/2009 Português
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37.036604%
A cana-de-açúcar é uma das principais culturas agrícolas plantadas no Brasil e apresenta significativa importância sócio-econômica e agroindustrial ao país. O cenário mundial encontrase bastante favorável no que concerne à comercialização de seus dois principais produtos derivados, o açúcar e o álcool, impulsionando o desenvolvimento do setor sucroalcooleiro nacional. Neste sentido, o melhoramento genético da cana-de-açúcar aparece como base fundamental para o desenvolvimento de novas variedades para a manutenção e incremento dos agronegócios da agroindústria sucroalcooleira. Técnicas de engenharia genética, como a transformação genética nuclear, estão trazendo excelentes resultados no melhoramento genético da cultura, permitindo diminuir o custo e o tempo de obtenção de novas variedades. Baseando-se na importância em se obter variedades tolerantes a diferentes estresses bióticos e abióticos que induzem perturbações metabólicas e ativam o processo de morte celular programada, o presente trabalho teve por objetivo transformar geneticamente a variedade de cana-de-açúcar RB835089 com o cDNA do gene AtBI-1 isolado de Arabidopsis thaliana, visando suprimir a indução do mecanismo de morte celular sob condição de estresse. Para isto...

Transformação genética de embriões somáticos de soja [Glycine max (L.) Merr.] utilizando o bombardeamento e sistema Agrobacterium de maneira integrada

Wiebke, Beatriz
Fonte: Universidade Federal do Rio Grande do Sul Publicador: Universidade Federal do Rio Grande do Sul
Tipo: Dissertação Formato: application/pdf
Português
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37.15582%
O objetivo do presente trabalho foi otimizar o sistema de transformação genética de embriões somáticos de soja [Glycine max (L.) Merr.] utilizando a biolística e o sistema Agrobacterium de maneira integrada. Os antibióticos, adicionados ao meio de cultura para supressão da bactéria após a transferência do transgene, foram o alvo do estudo. Inicialmente, comparou-se o efeito de diferentes tratamentos com antibióticos sobre o tecido embriogênico de soja e sua eficiência na supressão da linhagem LBA4404 de Agrobacterium tumefaciens durante o processo de transformação. A carbenicilina (500 mg/l) apresentou efeitos diferentes sobre o tecido vegetal das duas cultivares testadas. Os tecidos embriogênicos da cv. IAS5 não apresentaram diferenças significativas em relação ao controle, enquanto que a proliferação dos embriões somáticos da cv. Bragg foi três vezes maior com a adição deste antibiótico ao meio de cultura. Contudo, a presença da carbenicilina nas duas concentrações testadas (500 e 1000 mg/l) não foi eficiente para supressão de Agrobacterium. Por outro lado, nos tratamentos com cefotaxima sozinha (350 e 500 mg/l), ou cefotaxima (250 mg/l) + vancomicina (250 mg/l) esta bactéria foi completamente suprimida da superfície dos embriões somáticos após 49 dias de tratamento. No entanto...

Influence of antibiotics on embryogenic tissue and agrobacterium tumefaciens supression in soybean genetic transformation; Influência de antibióticos sobre o tecido embriogênico e a supressão de Agrobacterium tumefaciens na transformação genética de soja

Wiebke, Beatriz; Ferreira, Fabrício; Pasquali, Giancarlo; Bodanese-Zanettini, Maria Helena; Droste, Annette
Fonte: Universidade Federal do Rio Grande do Sul Publicador: Universidade Federal do Rio Grande do Sul
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: application/pdf
Português
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37.295808%
Foi avaliada a influência de diferentes tratamentos com antibióticos durante a transformação genética de soja. Inicialmente, desenvolveu-se um estudo para identificar como diferentes tratamentos com antibióticos afetam o tecido embriogênico da soja. O efeito da carbenicilina a 500 mg L-1 foi genótipodependente. Esse antibiótico não afetou a sobrevivência dos embriões da cv. IAS5, enquanto a proliferação dos embriões da cv. Bragg foi três vezes maior quando comparada com o controle. Por outro lado, cefotaxima, a 350 e 500 mg L-1, causou a morte dos tecidos embriogênicos de ambas as cultivares. Por fim, a associação de cefotaxima (250 mg L-1) + vancomicina (250 mg L-1) não afetou negativamente os embriões somáticos das cultivares testadas durante os 63 dias de tratamento. Posteriormente, foi realizado um segundo experimento para determinar a eficiência de diferentes tratamentos com antibióticos na supressão da linhagem LBA4404 de Agrobacterium tumefaciens durante a transformação genética. Nas condições da cultura, a carbenicilina, a 500 e 1000 mg L-1, não foi eficiente para a supressão de Agrobacterium. Por outro lado, os tratamentos com cefotaxima, 350 e 500 mg L-1, ou cefotaxima + vancomicina suprimiram eficientemente Agrobacterium após 49 dias. Os dados dos dois experimentos sugerem a cefotaxima + vancomicina por 49-63 dias como o tratamento mais apropriado. Esse é o primeiro registro do efeito de antibióticos sobre tecidos de soja. Foi identificada uma combinação de antibióticos que suprimiram A. tumefaciens com efeitos fitotóxicos mínimos...

Avaliação da mutagenicidade e antimutagenicidade de um biopolímero extraído do microorganismo Agrobacterium radiobacter em camundongos Swiss

Primo, Milka Selestina; Calliari, Caroline Maria; Castro-Gómez, Raúl Jorge Hernan; Mauro, Mariana de Oliveira; Mantovani, Mário Sérgio; Oliveira, Rodrigo Juliano
Fonte: Sociedade Brasileira de Farmacognosia Publicador: Sociedade Brasileira de Farmacognosia
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: 340-347
Português
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37.15582%
A presente pesquisa avaliou a ação mutagênica e antimutagênica de um biopolímero de glucose extraído da Agrobacterium radiobacter (Biopolímero de Agrobacterium radiobacter). O experimento foi realizado com camundongos Swiss machos divididos em oito grupos. O tratamento com o biopolímero foi realizado por gavage em dose única concomitante a uma dose de solução tampão fosfato nos grupos de avaliação da mutagenicidade, ou ao agente indutor de danos no DNA, ciclofosfamida, na concentração de 50 mg/kg (peso corpóreo - p.c.), nos grupos de avaliação da antimutagenicidade. Utilizou-se o teste de micronúcleo em sangue periférico e a coleta de sangue foi realizada 24 e 48 h após a aplicação das substâncias-teste. A análise estatística demonstrou que o biopolímero não possui atividade mutagênica e que é efetivo em prevenir danos no DNA. As porcentagens de redução de danos nos grupos de antimutagenicidade foram de 83,9%, 89,1% e 103,1% em 24 h e 101,24%, 98,14% e 120,64% em 48 h para as doses de 75, 150 e 300mg/kg (p.c.), respectivamente. A alta porcentagem de redução de danos associada à ausência de efeitos mutagênicos indica, além da atividade quimioprotetora, a possibilidade do biopolímero ser um alimento funcional candidato à utilização como co-adjuvante na quimioterapia para prevenir efeitos colaterais.; This study evaluated the mutagenic and ant mutagenic action of a biopolymer of glucose extracted from Agrobacterium radiobacter (Biopolymer of Agrobacterium radiobacter). The experiment was conducted with Swiss male mice divided into eight groups. Treatment with the biopolymer was performed in a single dose by gavage at a dose of concomitant phosphate buffer groups in the evaluation of mutagenicity...

Avaliação da produção de exopolissacarideo insoluvel por duas linhagens de Agrobacterium sp

Marcia Portilho
Fonte: Biblioteca Digital da Unicamp Publicador: Biblioteca Digital da Unicamp
Tipo: Tese de Doutorado Formato: application/pdf
Publicado em 12/07/2002 Português
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37.104492%
Determinadas bactérias do gênero Agrobacterium, isoladas de amostras de solo e não patogênicas, são produtoras de dois polissacarídeos extracelulares: a succinoglicana, ácida e solúvel, e a goma curdulana, um polímero neutro e insolúvel. Este último, aprovado pelo Food and Drug Administration (FDA) - USA - em 1996, vem sendo empregado na indústria de alimentos, devido à sua capacidade de formar um excelente gel, firme e resistente. O presente trabalho foi realizado com o objetivo de elaborar um meio para a obtenção do inóculo e avaliar aspectos relacionados à produção do polissacarídeo insolúvel de duas linhagens de Agrobacterium sp (ATCC 31749 e IFO 13140). No meio de cultivo para formação do inóculo microbiano, um extrato de levedura de procedência comercial foi definido como fonte de nitrogênio e de sais. Foram feitos testes com glucose, sacarose e melaço de cana-de-açúcar em diferentes concentrações como fonte de carbono. Verificou-se que o carboidrato teve um efeito estimulante no crescimento microbiano. O meio elaborado com o extrato de levedura e sacarose foi o que apresentou melhores resultados, quanto ao crescimento, para as duas linhagens. Os inóculos microbianos produzidos a partir deste meio mostraram-se adequados para a produção do polissacarídeo insolúvel em um meio de cultivo proposto na literatura. As amostras de polissacarídeo insolúvel...

Hypericum perforatum plant cells reduce Agrobacterium viability during co-cultivation

Franklin, Gregory; Conceição, Luís F. R.; Kombrink, E.; Dias, Alberto Carlos Pires
Fonte: Springer-Verlag Publicador: Springer-Verlag
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2008 Português
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37.15582%
Plant recalcitrance is the major barrier in developing Agrobacterium-mediated transformation protocols for several important plant species. Despite the substantial knowledge of T-DNA transfer process, very little is known about the factors leading to the plant recalcitrance. Here, we analyzed the basis of Hypericum perforatum L. (HP) recalcitrance to Agrobacterium-mediated transformation using cell suspension culture. When challenged with Agrobacterium, HP cells swiftly produced an intense oxidative burst, a typical reaction of plant defense. Agrobacterium viability started to decline and reached 99% mortality within 12 h, while the plant cells did not suffer apoptotic process. This is the Wrst evidence showing that the reduction of Agrobacterium viability during co-cultivation with recalcitrant plant cells can affect transformation.; Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT) - POCTI/AGR/40283/2001, SFRH/BPD/17102/ 2004

Influence of antibiotics on embryogenic tissue and Agrobacterium tumefaciens suppression in soybean genetic transformation

Wiebke,Beatriz; Ferreira,Fabricio; Pasquali,Giancarlo; Bodanese-Zanettini,Maria Helena; Droste,Annette
Fonte: Instituto Agronômico de Campinas Publicador: Instituto Agronômico de Campinas
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2006 Português
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37.104492%
The influence of different antibiotic treatments in soybean genetic transformation was evaluated. First, an assay was performed to verify how different antibiotic treatments affect soybean embryogenic tissues. The effect of carbenicillin at 500 mg L-1 was genotype-dependent. This antibiotic did not affect embryo survival of cv. IAS5, but a three-fold increase of embryo proliferation was observed for cv. Bragg, when compared to the control. On the other hand, cefotaxime at 350 and 500 mg L-1 caused death of embryogenic tissues of both cultivars. Finally, the association of cefotaxime (250 mg L-1) + vancomycin (250 mg L-1) did not affect negatively the somatic embryos of tested cultivars until 63 days of treatment. Thereafter, a second experiment was carried out to determine the efficacy of different antibiotic treatments in suppressing LBA4404 Agrobacterium tumefaciens strain in genetic transformation. On tissue culture conditions, carbenicillin at 500 and 1000 mg L-1 was not active against Agrobacterium. On the other hand, treatments with cefotaxime at 350 and 500 mg L-1, and cefotaxime + vancomycin efficiently suppressed Agrobacterium during 49 days. Data of both experiments suggested cefotaxime + vancomycin for 49-63 days as the most appropriate treatment. This is the first work reporting the effect of antibiotics on soybean tissues. By identifying an antibiotic combination that suppressed A. tumefaciens with minimal phytotoxic effects...

SAAT: tranformação de plantas mediada por ultra-som e Agrobacterium

Santarém,Eliane Romanato
Fonte: Universidade Federal de Santa Maria Publicador: Universidade Federal de Santa Maria
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/08/2000 Português
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37.15582%
Vários métodos para transferência de genes em plantas têm sido propostos, possibilitando a produção de plantas transgênicas das espécies cultivadas de maior importância no mundo. Apesar da transformação de plantas utilizando Agrobacterium ter vantagens sobre os sistemas que não utilizam vetares biológicos, sua eficiência para a transferência de DNA ainda é baixa. Recentemente, foi proposta uma tecnologia, denominada SAAT (Transformação mediada por Agrobacterium e Ultra-som), que consiste no tratamento de tecidos vegetais com ultra-som em presença de Agrobacterium. Estudos com microscópio eletrônica de varredura e microscópio óptica mostraram que o tratamento com SAAT produz um grande número de ferimentos pequenos e uniformes na superfície do tecido, permitindo o acesso da Agrobacterium a tecidos subepidérmicos. SAAT aumentou a eficiência de transformação em diferentes tecidos, incluindo cotilédones imaturos, tecido foliar, culturas em suspensão, embriões somáticos e zigóticos. De várias espécies, entre elas, soja, caupi, Picea glauca, trigo e milho. Essa nova tecnologia permite aumentar a eficiência de transformação para várias espécies, principalmente aquelas recalcitrantes para Agrobacterium.

Agrobacterium-mediated transformation of sorghum: factors that affect transformation efficiency

Carvalho,Carlos Henrique S.; Zehr,Usha B.; Gunaratna,Nilupa; Anderson,Joseph; Kononowicz,Halina H.; Hodges,Thomas K.; Axtell,John D.
Fonte: Sociedade Brasileira de Genética Publicador: Sociedade Brasileira de Genética
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/01/2004 Português
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37.15582%
The results presented in this work support the hypothesis that Agrobacterium-mediated transformation of sorghum is feasible, analogous to what has been demonstrated for other cereals such as rice, maize, barley and wheat. The four factors that we found most influenced transformation were: the sensitivity of immature sorghum embryos to Agrobacterium infection, the growth conditions of the donor plant, type of explant and co-cultivation medium. A major problem during the development of our protocol was a necrotic response which developed in explants after co-cultivation. Immature sorghum embryos proved to be very sensitive to Agrobacterium infection and we found that the level of embryo death after co-cultivation was the limiting step in improving transformation efficiency. The addition of coconut water to the co-cultivation medium, the use of vigorous and actively growing immature embryos and the removal of excess bacteria significantly improved the survival rate of sorghum embryos and was critical for successful transformation. Hygromycin phosphotransferase (hpt) proved to be a good selectable marker for sorghum. We also found that b-glucuronidase (GUS) activity was low in most of the transgenic plant tissues tested, although it was very high in immature inflorescences. Although promising...

Agrobacterium-Mediated Root Transformation Is Inhibited by Mutation of an Arabidopsis Cellulose Synthase-Like Gene1

Zhu, Yanmin; Nam, Jaesung; Carpita, Nicholas C.; Matthysse, Ann G.; Gelvin, Stanton B.
Fonte: The American Society for Plant Biologists Publicador: The American Society for Plant Biologists
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em /11/2003 Português
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Agrobacterium-mediated plant genetic transformation involves a complex interaction between the bacterium and the host plant. Relatively little is known about the role plant genes and proteins play in this process. We previously identified an Arabidopsis mutant, rat4, that is resistant to Agrobacterium transformation. We show here that rat4 contains a T-DNA insertion into the 3′-untranslated region of the cellulose synthase-like gene CSLA9. CSLA9 transcripts are greatly reduced in the rat4 mutant. Genetic complementation of rat4 with wild-type genomic copies of the CSLA9 gene restores both transformation competence and the wild-type level of CSLA9 transcripts. The CSLA9 promoter shows a distinct pattern of expression in Arabidopsis plants. In particular, the promoter is active in the elongation zone of roots, the root tissue that we previously showed is most susceptible to Agrobacterium-mediated transformation. Disruption of the CSLA9 gene in the rat4 mutant results in reduced numbers and rate of growth of lateral roots and reduced ability of the roots to bind A. tumefaciens cells under certain conditions. No major differences in the linkage structure of the non-cellulosic polysaccharides could be traced to the defective CSLA9 gene.

Development of a simple and rapid agrobacterium tumefaciens-mediated transformation system for the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae var. acridum

Duarte, Rubens Tadeu Delgado; Staats, Charley Christian; Fungaro, Maria Helena Pelegrinelli; Schrank, Augusto; Vainstein, Marilene Henning; Maia, Luciana Furlaneto; Nakamura, Celso Vataru; Souza, Wanderley de; Furlaneto, Márcia Cristina
Fonte: Inmetro - Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia Publicador: Inmetro - Instituto Nacional de Metrologia, Qualidade e Tecnologia
Tipo: Artigo de Revista Científica
Português
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37.19599%
7 p. : il.; Aims: To examine the ability of Agrobacterium to attach to Metarhizium anisopliae var. acridum strain CG423 under co-cultivation and to develop an Agrobacterium- mediated method of gene delivery into strain CG423, a promising agent for biological control of grasshoppers. Methods and Results: The co-cultivation of Agrobacterium tumefaciens and M. anisopliae var. acridum was analysed under scanning electron microscopy. We observed that Agrobacterium attached to and formed aggregates around Metarhizium conidia and germ tubes. We also observed the occurrence of fibril-like structures connecting neighbouring bacterial–fungal cells. The Agrobacterium- mediated transformation was applied using two binary vectors carrying a benomyl resistance gene as a selection marker. The efficiency of transformation was up to 53 transformants per 105 target conidia. High mitotic stability of the transformants (89–97%) was demonstrated after five successive transfers on non-selective media. Molecular analysis revealed the occurrence of high frequency of gene conversion. Conclusions: In our study, we report that A. tumefaciens strain AGL-1 attaches to and genetically transforms the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae var. acridum. Significance and Impact of the Study: We report for the first time...

Agrobacterium tumefaciens supports DNA replication of diverse geminivirus types

Selth, L.; Randles, J.; Rezaian, M.
Fonte: Elsevier Science BV Publicador: Elsevier Science BV
Tipo: Artigo de Revista Científica
Publicado em //2002 Português
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37.104492%
We have previously shown that the soil-borne plant pathogen Agrobacterium tumefaciens supports the replication of tomato leaf curl geminivirus (Australian isolate) (TLCV) DNA. However, the reproducibility of this observation with other geminiviruses has been questioned. Here, we show that replicative DNA forms of three other geminiviruses also accumulate at varying levels in Agrobacterium. Geminiviral DNA constructs that lacked the ability to replicate in Agrobacterium were rendered replication-competent by changing their configuration so that two copies of the viral ori were present. Furthermore, we report that low-level replication of TLCV DNA can occur in Escherichia coli containing a dimeric TLCV construct in a high copy number plasmid. These findings were reinforced by expression studies using β-glucuronidase which revealed that all six TLCV promoters are active in Agrobacterium, and two are functional in E. coli.; http://www.elsevier.com/wps/find/journaldescription.cws_home/506085/description#description; Luke A. Selth, John W. Randles and M. Ali Rezaian; Copyright © 2002 Published by Elsevier Science B.V. All rights reserved.

Improving the genetic transformation efficiency of Cucumis melo subsp. melo ‘Piel de Sapo’ via Agrobacterium

Castelblanque, L.; Marfa, V.; Claveria, E.; Martinez, I.; Perez-Grau, L.; Dolcet-Sanjuan, R.
Fonte: INRA. Centre de Recherche d'Avignon. Unité Génétique et Amélioration des Fruits et Légumes, Montfavet (France) Publicador: INRA. Centre de Recherche d'Avignon. Unité Génétique et Amélioration des Fruits et Légumes, Montfavet (France)
Tipo: Poster
Português
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37.036604%
The effects of five Agrobacterium strains, two selection agents, and co-culture conditions were evaluated on the transformation efficiency of three melon lines (‘T111’, ‘PS8’, ‘PNY’) belonging to the cultivar Cucumis melo subsp. melo ‘Piel de Sapo’, the C. melo subsp. melo ‘Védrantais’ line, and the accession C. melo subsp. agrestis ‘PI 161375’. Transformation efficiencies for accession ‘PI 161375’ (10.6 %) were higher than those obtained for ‘Piel de Sapo’ (0.1 %) or ‘Védrantais’ (3.1 %). Among the ‘Piel de Sapo’ lines, the highest rates of transformation were observed with ‘T111’. Selection with pmi solved the problem of escapes encountered with nptII on ‘Piel de Sapo’. Results on the number of explants with GUS expression indicated that co-culture at 28ºC gave a better response than at 23ºC. The higher transformation efficiency of ‘PI 161375’ was not explained by its competence to Agrobacterium infection, determined by early GUS expression, but most probably by a higher regeneration capacity. With the objective of selecting a ‘Piel de Sapo’ line with a higher regeneration and transformation performance, a population of NILs, derived from a cross between the Korean accession ‘PI 161375’ and the ‘Piel de Sapo’ line ‘T111’...

Estudo de fatores que influenciam o processo de transformação genética em citros via Agrobacterium tumefaciens.; Study of factors that influence the citrus genetic transformation process via Agrobacterium tumefaciens.

Barbosa, Janaynna Magalhães
Fonte: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP Publicador: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
Tipo: Dissertação de Mestrado Formato: application/pdf
Publicado em 05/07/2002 Português
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37.036604%
A transformação genética está se tornando uma importante ferramenta, dentro dos programas de melhoramento genético de citros, e uma alternativa para contornar barreiras naturais da espécie, que dificultam o desenvolvimento de novas variedades pelo melhoramento convencional. Entretanto, os protocolos utilizados para transformação genética de citros têm resultado num baixo número de plantas transgênicas. Com o objetivo de estudar fatores que possam influenciar o processo de transformação genética de citros via Agrobacterium tumefaciens analisou-se o efeito do uso de acetoseringona em diferentes etapas do processo, as condições de incubação dos explantes durante e após o período de co-cultivo e o tipo de corte do explante. Foram utilizados segmentos de epicótilo de plântulas germinadas in vitro da variedade de laranja doce ‘Hamlin’ (Citrus sinensis L. Osbeck.) e da variedade citrange ‘Carrizo’ (C. sinensis x Poncirus trifoliata Raf.), inoculados com a estirpe EHA 105 de A. tumefaciens, contendo o plasmídeo p35SGUSINT, com o gene de seleção que codifica a enzima neomicina fosfotransferase II (nptII) e o gene repórter uidA que codifica a enzima b-glucuronidase (gus). O protocolo básico para transformação genética foi com a inoculação dos explantes por 20 minutos...

Biosíntesis de succinoglicano y de compuestos relacionados en Agrobacterium radiobacter; Biosynthesis of succinoglycan in Agrobacterium radiobacter

Bassi, Daniel Ernesto
Fonte: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires Publicador: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Tipo: info:eu-repo/semantics/doctoralThesis; tesis doctoral; info:eu-repo/semantics/publishedVersion Formato: application/pdf
Publicado em //1996 Português
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37.228286%
Agrobacterium radiobacter produce un polisacárido extracelular (EPS), el succinoglicano, cuya unidad repetitiva (U.R.) es un octasacárido constituído por Glc, Gal, piruvato y succinato en relación 7:1:1:1 (Amemura et al; 1981, Carbohydr. Res. 91:59-65): Glcß1--3Glcß1--3Glcß1--6Glcß1-- 6Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--3Gal—4-6-4Pyr (ver en versión PDF). Este polisacárido tiene gran importancia en la industria del petróleo, y el producto comercial, se extrae de la bacteria en estudio debido a que lo produce en cantidades elevadas. En otros sistemas, se ha demostrado que la biosíntesis de EPS se realiza fundamentalmente en cuatro etapas (Ielpi et al, 1993, J. Bacteriol, 175: 2490-2500). En la primera, se sintetizan los nucleótido-azúcares precursores. En una segunda etapa, se forma la U.R. por transferencia secuencial de los distintos monosacáridos que la componen a partir de los respectivos nucleótido-azúcares a un prenil-fosfato aceptor ubicado en la membrana plasmática. Estas reacciones están catalizadas por enzimas específicas, las glicosiltransferasas. Una vez completada la U.R., ésta actúa como monómero en una reacción de polimerización, siendo el producto final el EPS. Es probable que la polimerización y el transporte al exterior celular (cuarta etapa) del polímero sean simultáneos. En este estudio...

Biosíntesis de succinoglicano y de compuestos relacionados en Agrobacterium radiobacter; Biosynthesis of succinoglycan in Agrobacterium radiobacter

Bassi, Daniel Ernesto
Fonte: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires Publicador: Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires
Tipo: Tesis Doctoral Formato: text; pdf
Publicado em //1996 Português
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Agrobacterium radiobacter produce un polisacárido extracelular (EPS), el succinoglicano, cuya unidad repetitiva (U.R.) es un octasacárido constituído por Glc, Gal, piruvato y succinato en relación 7:1:1:1 (Amemura et al; 1981, Carbohydr. Res. 91:59-65): Glcß1--3Glcß1--3Glcß1--6Glcß1-- 6Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--4Glcß1--3Gal—4-6-4Pyr (ver en versión PDF). Este polisacárido tiene gran importancia en la industria del petróleo, y el producto comercial, se extrae de la bacteria en estudio debido a que lo produce en cantidades elevadas. En otros sistemas, se ha demostrado que la biosíntesis de EPS se realiza fundamentalmente en cuatro etapas (Ielpi et al, 1993, J. Bacteriol, 175: 2490-2500). En la primera, se sintetizan los nucleótido-azúcares precursores. En una segunda etapa, se forma la U.R. por transferencia secuencial de los distintos monosacáridos que la componen a partir de los respectivos nucleótido-azúcares a un prenil-fosfato aceptor ubicado en la membrana plasmática. Estas reacciones están catalizadas por enzimas específicas, las glicosiltransferasas. Una vez completada la U.R., ésta actúa como monómero en una reacción de polimerización, siendo el producto final el EPS. Es probable que la polimerización y el transporte al exterior celular (cuarta etapa) del polímero sean simultáneos. En este estudio...

Avanços na transformação genética de plantas mediada por Agrobacterium com ênfase em soja; Advances in Agrobacterium-mediated plant transformation with enphasys on soybean

Mello-Farias, Paulo Celso de; Chaves, Ana Lúcia Soares
Fonte: Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Publicador: Universidade de São Paulo. Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz
Tipo: info:eu-repo/semantics/article; info:eu-repo/semantics/publishedVersion; ; ; ; ; Formato: application/pdf
Publicado em 01/02/2008 Português
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37.036604%
A soja é uma das maiores fontes de proteína vegetal da humanidade. É também muito importante na alimentação animal e como matéria-prima industrial. Grandes avanços foram recentemente alcançados em sua transformação genética. O objetivo desta revisão é fornecer uma discussão acerca de importantes fatores que influenciam a transformação de soja mediada por Agrobaterium, incluindo tecidos alvo, condições do tecido vegetal, métodos de injúria, sistemas de regeneração, marcadores de seleção e genes repórter.; Soybean is one of humanity's major sources of plant protein. It is also very important for animal feed and as industrial raw material. Great advances have recently been achieved in its genetic transformation. This review provides a comprehensive discussion of important factors affecting Agrobacterium-mediated soybean transformation including target tissues, plant tissue health, wounding methods, regeneration systems, selectable markers and reporter genes.

ORGANOGENESIS AND GENETIC TRANSFORMATION OF YELLOW PASSION FRUIT (Passiflora edulis f. flavicarpa DEG.) WITH THE GENES CMe-ACO1 AS AND nptII THROUGH Agrobacterium tumefaciens; ORGANOGÊNESE E TRANSFORMAÇÃO GENÉTICA DE MARACUJÁ AMARELO (Passiflora edulis f. flavicarpa DEG.) COM OS GENES CMe-ACO1 AS E nptII VIA Agrobacterium tumefaciens

WINKLER, Larissa Macedo
Fonte: UFPR Publicador: UFPR
Tipo: info:eu-repo/semantics/article; info:eu-repo/semantics/publishedVersion; Artigo Avaliado pelos Pares Formato: application/pdf
Publicado em 09/12/2005 Português
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Brazil is the main world producer of yellow passion fruit (Passiflora edulis f. flavicarpa). Fruits have a great nutritive and pharmaceutic value. They are commercialized in natura and industrialized for national market and exportation. Passion fruits present a high loss of water during fruit ripening, what is a concern for transport. In order to improve fruit quality and storage life, experiments were carried out for regeneration of plants from leaf explants of Passiflora edulis and for introduction of an antisense melon ACCoxidase gene (LEM1) via Agrobacterium tumefaciens strain carrying binary vectors. During climateric fruits ripening process, like yellow passionfruit, 1-carboxylic-1-aminocyclopropane (ACC) is converted into ethylene by the action of ACCoxidase enzyme. Two regeneration experiments were conducted, using Murashige and Skoog (1962) as basic medium. The effect of several factors was evaluated: physiological age of the explants (juvenile and adult), position of the explant on culture medium (with abaxial or adaxial face in contact with the medium), and three concentrations of benzyladenine (BAP) (1.0, 1.5 and 2.0 mg.L-1). The following data were recorded: percentage of regenerating leaf explants, mean number of buds per explant...

Métodos para la detección de Agrobacterium a partir de muestras de material vegetal, suelo y agua

Alippi,Adriana M; López,Ana C; Balatti,Pedro A
Fonte: Revista argentina de microbiología Publicador: Revista argentina de microbiología
Tipo: Artigo de Revista Científica Formato: text/html
Publicado em 01/12/2011 Português
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El género Agrobacterium incluye especies ftopatógenas que inducen la formación de agallas en el cuello o la proliferación de raíces en cabellera en más de 600 especies de dicotiledóneas, y especies no patógenas cuyo hábitat natural es el suelo. Como no es posible erradicar a las especies patógenas y habida cuenta de que más del 80 % de las infecciones puede provenir de viveros, es importante evitar la diseminación de la enfermedad. Por ello, el objetivo de este trabajo ha sido desarrollar técnicas sensibles y precisas que, aisladamente o combinadas, permitan detectar la presencia de especies y biovares de Agrobacterium a partir de muestras de material vegetal, suelo y agua. Se comprobó que con la estrategia combinada de realizar aislamientos en los medios semiselectivos D1, D1-M y YEM-RCT; PCR multiplex sobre el gen 23S ADNr; PCR específca sobre los genes virC1 y virC2 y bioensayos en plántulas de pimiento cv. California Wonder y en hojas cortadas de kalanchoe, se reduce la posibilidad de obtener falsos negativos y/o falsos positivos. Por lo expuesto, esta combinación de técnicas constituye una herramienta adecuada para el diagnóstico de cepas patógenas de Agrobacterium a partir de distintos tipos de muestras.